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    乳酸 测定
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    白酒中乳酸的测定方法1、气相色谱法1.1仪器与试剂安捷伦6890气相色谱仪,FID检测器,酸度计色谱纯乳酸(Aldrich Chemical company提供),苄基溴,2-乙基丁酸,无水乙醇1.2 色谱条件色谱柱为HP-FFAP19091F-413型(30m*0.32mm*0.25μm)毛细管柱,进样口温度250℃,检测器温度300℃,柱箱升温程序170℃保持8min,以15℃/min升温到200℃保持5min,进样口压力为35kpa,柱流量0.6ml/min,分流比为进样0.1min以内不分流,之后分流比为30ml/min。1.3 试剂及标准溶液的配制1.3.1 内标溶液的配制精确称取2-乙基正丁酸0.25克,置于50ml容量瓶中,以60%(V/V)的酒精定容至刻度,摇匀。1.3.2 标准物储备液的配制精确称取乳酸0.5g,置于50ml的容量瓶中,以蒸馏水定容至刻度,摇匀,配成标准储备液。1.4 样品预处理1.4.1 试样处理准确吸取20ml酒样,在250ml烧杯中,准确加入5.0g/L的2-乙基丁酸内标溶液1.0ml,电磁搅拌下用0.035mol/L左右的四丁基氢氧化铵中和至pH8.5~9。定量移至125ml的蒸发皿中,水浴蒸干。冷却后加入5命令丙酮,使充分溶解,静置片刻,吸取上层清液2ml于10ml洁净、干燥的带盖比色管中备用。酯化1.4.2 酯化按计算用100μl微量注射器吸取苄基溴,加入上述比色管中加盖,摇匀。在室温(不低于15℃)下静置酯化反应2h备用。式中: c——四丁基氢氧化铵的浓度(mol/L)V——四丁基氢氧化铵的滴定体积(ml)171.04——苄基溴的相对分子量1.438——苄基溴的相对密度2/5——试样分取比例1.3——苄基溴过量30%,以保证酯化完全1.5 结果与讨论1.5.1线性关系的测定精确吸取乳酸标准储备液0.1ml、0.4ml、0.8ml、1.2ml、1.6ml、分别置于5个250ml烧杯中,然后各精确加入1ml的内标液,加入20ml蒸馏水,配成5个不同浓度的标准工作液,按上述方法进行样品预处理,分别平行测定4次,取平均值。以待测组分与内标溶液的质量浓度比X为横坐标、峰面积比Y为纵坐标,绘制标准工作曲线。在0~950mg/L的范围内,对乳酸的测定值进行线性回归,回归方程的斜率为0.77678,在Y轴上截距为-0.0009395,相关系数r为0.99975,工作曲线具有良好的线性。1.5.2 样品的测定准确吸取20ml酒样,在250ml烧杯中,准确加入5.0g/L的2-乙基正丁酸内标溶液1.0ml,按上述方法进行样品预处理后,注样1μl,以上述标准工作曲线测定乳酸的含量。1.5.3 精密度用内标工作曲线法测定样品,平行测定7次,精密度满足分析要求,其结果见表1。表1 精密度试验结果(n=7)样品测定值(mg/L)平均值SDRSD(%)1234567乳酸271.15271.53272.33272.19271.69271.53271.64271.720.410.151.5.4 回收率取20ml样品各3份,其中1份作本底量,另外2份各添加已知量的标准液,经上述样品预处理后,测出乳酸在样品中的含量,并根据检测量计算出乳酸的回收率和精密度,结果表明样品的回收率及准确度满足分析要求,结果见表2。表2 回收率试验结果(n=5)样品本底值(mg/L)加入量(mg/L)本底值与实测值之差(mg/L)平均回收率(%)RSD(%)乳酸242.2659.2156.9696.20.015242.26296.04303.45102.50.382、比色法比色法是常规化学分析中一种经常使用的分析方法,它可以对白酒中的乳酸进行有效的定性定量分析,酒样中乳酸的含量可在显色后与乳酸标准系列管的比色中得出。3.综合法综合法是指利用理化分析和色谱分析数据,求取乳酸的含量。根据陈周平对浓香型白酒的测定结果,己酸、乙酸、乳酸、丁酸4种酸占有机酸总量的90%以上,以总酸含量减去色谱柱流出各单一酸种的含量即得乳酸的含量。3.1 总酸的测定总酸的测定方法遵循GB/T1.345.4-89中规定的方法,因此,它测得的是白酒中所有酸含量的总和,记为A总g/L(以乙酸计)。3.2 毛细管测定白酒中的有机酸安捷伦6890气相色谱仪,FID检测器,色谱柱为HP-FFAP19091F-413型(30m*0.32mm*0.25μm)毛细管柱。色谱定量结果:乙酸(记为A乙g/L)下同、丙酸(A丙g/L)、丁酸(A丁g/L)、异丁酸(A异丁g/L)、戊酸(A戊g/L)、己酸(A己g/L)、庚酸(A庚g/L)、辛酸(A辛g/L)。3.3 乳酸含量的求取根据陈周平对浓香型白酒的测定,白酒中的有机酸含量有下列趋势:乙酸>己酸>乳酸>丁酸>甲酸>戊酸>棕榈酸>亚油酸>油酸>辛酸>异丁酸>丙酸>异戊酸>庚酸,而乙酸、己酸、乳酸、丁酸的含量加上辛酸、异丁酸、戊酸、庚酸、丙酸的含量占其总酸含量的95%以上,其他的酸特别是高级脂肪酸的含量只有在发酵期较长的优质酒中才有一定的含量,在一般发酵期和一般质量的酒中,含量甚微,因此,未测出的有机酸基本都可以忽略不计。所以乳酸的含量求得为:A乳酸=A总- A乙- A丁-A丙- A异丁- A戊- A己- A庚- A辛式中:各值均以乙酸计。附录1 总酸与总的酸总酸:是用0.1mol/LnaOH去滴定50ml酒样,以1%酚酞为指示剂,至微红色,为其终点,通过计算得出酒中总酸的含量(以乙酸 计,g/L)。总的酸:是将色谱检测出的各种酸(没按乙酸计),全加在一起的量。各种酸(A1、A2、……)的量当折成总酸(以乙酸计时)须引入一个系数(f1、f2、……)才能将二者有机的联系起来。引入的系数可按下式计算: 根据这一公式,寻找有关酸的换算系数,详见表3,总的酸可按下式,换算成总酸:总的酸(没按乙酸计)=A1+A2+……总酸(按乙酸计)=f1A1+f2A2+……总酸(以乙酸计)要小于总的酸。表3 常用酸的换算系数名称系数f相对密度()纯度,%≥甲酸1.3034 乙酸11.0492 90丙酸0.81060.9920 99.5丁酸0.68110.9577 98戊酸0.58760.9391 己酸0.5170.9290 98庚酸0.46120.9184 辛酸0.41630.9100 壬酸0.37950.9052 99癸酸0.34860.8858 乳酸0.66661.2485 桂酸0.40531.2450 99亚油酸0.21570.9046 油酸0.21260.8906 棕榈酸0.23420.8530 苹果酸0.89631.6010  附录2:四丁基氢氧化铵与苄基溴四丁基氢氧化铵:Tetrabutyllammonium hydroxide solutuon(CH3CH2CH2CH2)4NOH 分子量259.48沸点:96.7℃ 比重:0.972苄基溴 benzyl bromide 即溴化苄 α—溴甲苯C6H5CH2Br 【分子式】C7-H7-BR【CAS号】100-39-0 【分子量】171.04无色或浅黄色液体,有强烈的催泪作用,能与醇,苯,醚相继混溶液,在水中级慢溶解, 【比重】1.438(20℃)【熔点】-4.0℃【沸点】198℃蒸汽密度】5.8【急性毒性】猫吸入浓度29PPM (15分钟), 三日后死亡【毒性分级】高毒【燃烧热值】1023.5千卡/克分子【闪点】86℃【可燃性危险特性】明火可燃; 高热放出有毒溴化物气体【储运事项】库房通风低温干燥; 与氧化剂、食品添加剂分开存放【灭火剂】泡沫、雾状水、砂土、二氧化碳。
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